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超低溫保存液置于含有細菌的冷凍保護劑的安瓿瓶，瓶安瓿液氮（- 196℃）保存。當菌絲體在196℃時，它的新陳代謝減少到停止的狀態。
最的液氮超低溫保存種
具體操作如下：
（1）菌株培養在PDA培養基平板培養22-24日在10-15天，在菌絲生長、瓊脂塊被切斷穿支（直徑2-4毫米）或切成2毫米X4毫米的矩形塊的手術刀片。
（2）玻璃安瓿安瓿管的制備，能夠經受突然的溫度而不破裂，易被火焰密封管，易于開啟培養。一般使用硼硅酸鹽玻璃管，大小根據需要，通常安瓿瓶的75毫米×10毫米或1.2毫升的液體體積是適當的。
選用安瓿管，用墨水書寫，細菌菌種保存在管壁的食用菌中，160度干熱滅菌，使標記牢固地固定在管壁上。
（3）水甘油水溶液或10%個亞甲基為保護劑溶液，每管加入0.8毫升蒸10%可以作為冷凍保護劑。
用無菌鑷子菌絲塊與瓊脂塊移動及安瓿管保護劑。火焰管上密封安瓿，浸在水中檢查漏氣。
（4）小塑料安瓿瓶氮氣保護管有良好的細菌放置孔（放一塊鐵，塑料瓶底部用安瓿瓶制成的塑料瓶可以用液氮罐），瓶蓋，連接瓶里的一個字符串和標記，從而提出應變。將塑料瓶安瓿管掛在罐口，安瓿管慢慢冷卻，大約30后，安瓿管浸入液氮中進行長期保存。
使在液氮罐中保存的細菌，應該是35-40度溫水瓶在瓶，冰迅速融化的瓶子，然后打開安瓿瓶無菌條件下接種細菌在適宜的培養基嵌段接枝，22-24°C活化培養。
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